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BUNSEN本生2.0ml凍存管的使用,你知道嗎?

更新時間:2022-08-25    點擊次數:950

  2.0ml凍存管能耐受-196℃低溫的聚丙烯制成,有硅膠環以保證密封,所有可立凍存管底部經特殊設計,可固定在凍存架或托盤上供單手操作,無菌,無熱源認證。

 
  2.0ml凍存管樣品的制備:
 
  1、培養細胞蛋白質樣品的制備:
 
  (1)在合適的鹽濃度下,應保持蛋白質的最大溶解性和可重復性。
 
  (2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價結合的蛋白質復合物和共價鍵二硫鍵,使其形成一個各自多肽的溶液。
 
  (3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
 
  (4)防止蛋白質在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應在低溫下進行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
 
  (5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態置-80℃中保存,但要注意不要反復凍融。
 
  2、組織樣品的制備:
 

  手術切除的組織塊迅速置于預冷的0.95生理鹽水中,漂洗數次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,加入相應體積的裂解液進行勻漿,離心收集上清加入Laemmli樣品緩沖液強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒。


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