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Elisa實驗:如何判斷酶標板是否失效?

更新時間:2025-06-17    點擊次數(shù):229

  Elisa實驗:如何判斷酶標板是否失效?

  以下是天津本生判斷酶標板是否失效的全面檢測方法及標準,涵蓋物理檢查、功能測試和實驗驗證:

  一、?物理檢查?

  外觀檢測?

  觀察板孔是否有劃痕、變形或污染,破損的板孔會導致液體分布不均。

  檢查密封性:未密閉保存的酶標板可能因吸附水分或干燥失效。

  透光率測試?

  用酶標儀檢測空板吸光度(主波長450nm,參考波長630nm),若透光率不均(CV值>10%)提示板子性能下降。

  

Elisa實驗:如何判斷酶標板是否失效?


  二、?功能驗證?

  蛋白吸附能力測試?

  包被50μg/mL IgG過夜,BCA法檢測吸附前后蛋白濃度差,吸附量下降>20%表明板子失效。

  空白值檢測?

  加入緩沖液后測OD值,空白孔OD>0.2(夾心法)提示非特異性吸附增加。

  三、?實驗驗證?

  標準曲線測試?

  使用已知濃度標準品檢測,若線性相關(guān)系數(shù)(R值)<0.99或梯度顯色異常,提示板子失效。

  復孔CV值>8%表明板孔間一致性差。

  顯色反應驗證?

  正常TMB底物顯色應為藍色→黃色(終止后),若顯色延遲或顏色異常需更換板子。

  四、?保存條件追溯?

  商品化板需4℃密閉保存,自包被板有效期更短;若長期暴露于高溫或濕度>60%環(huán)境,建議棄用。

  五、?操作對照?

  同步使用新板對比檢測,若舊板結(jié)果偏差>15%則判定失效。

  通過以上方法可綜合評估酶標板狀態(tài),失效板需及時更換以避免實驗誤差。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細說明,可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。

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