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BUNSEN熱訊:胎牛血清常見問題解答

更新時間:2024-01-24    點擊次數(shù):3199

  BUNSEN熱訊:胎牛血清常見問題解答


  Q: 應該如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損?

  A:建議血清應保存在-20°C。若一次無法用完一瓶,無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍時,建議將血清從冷凍室先移至2-8°C冰箱解凍,再放置于室溫進行解凍。請注意,解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。BUNSEN不推薦將FBS在37C長時間孵育解凍,胎牛血清。

  Q: 熱滅活是必須的嗎?

  A:實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中局部溫度過高,搖顯不均勻,滅活時間過長,都會造成血清品質下降。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,更確保血清的質量!

  Q: 如何進行血清的熱滅活?胎牛血清

  A:滅活之前必須先搖勻解凍的血清并恢復到室溫

  (1)取部分搖勻的血清 (50ML離心管) ,選用同規(guī)格的對照管一個。;

  (2)對照管內(nèi)放入與血清等體積的水:

  Q: 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎 ?

  A:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在2周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

  (3)溫度預試:對照管內(nèi)插入溫度計,顯示56°C時,將恢復到室溫的血清,放入水浴鍋。滅活過程中,經(jīng)常輕輕晃動搖勻 (如: 每隔5MIN),保證溫度均一。

  Q: 細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎 ? 如何處理?

  A:一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何

  變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:

  (1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸:

  (2)配制培養(yǎng)基的 PH值偏高,不宜細胞生長:

  (3)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除

  (4)血清等級不足以維持細胞良好的生長。

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