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對(duì)于血清知識(shí)點(diǎn),圍觀的看過來!

更新時(shí)間:2023-05-11    點(diǎn)擊次數(shù):1624

  對(duì)于血清知識(shí)點(diǎn),圍觀的看過來!

  由于血清來源于動(dòng)物,且含有細(xì)胞培養(yǎng)中所需要的各種營(yíng)養(yǎng)(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等),這奠定了血清是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中的試劑的基礎(chǔ)。

  目前血清的采集地主要分布在以下國(guó)家:

  市面上的牛血清產(chǎn)品名稱雖然對(duì)較多,但根據(jù)其不同的特性,大致可以分為以下四種。根據(jù)牛的取血年齡可以區(qū)分:

  胎牛血清

  胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡(jiǎn)稱FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。

  國(guó)產(chǎn)胎牛血清

  國(guó)產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名)指的是出生4-6小時(shí),且未進(jìn)行哺乳(unsuckled)進(jìn)食的新生牛,有時(shí)還稱作國(guó)產(chǎn)新生牛血清。

  新生牛血清

  新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡(jiǎn)稱NBCS,或稱小牛血清)指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛血清。

  成年牛血清

  成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡(jiǎn)稱ABS)指的是取血時(shí)牛齡通常超過12個(gè)月的牛血清。

  以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因?yàn)榕Q酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。

胎牛血清 天津本生

  幾種血清的比較:

  


  這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。

  胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

  胎牛血清成分已知的有上千多種,以下為主要成分表:

  


  以下是BUNSEN本生技術(shù)小編為您總結(jié)的血清相關(guān)的知識(shí)點(diǎn):

  1、血清的顏色如何?

  為何有的胎牛血清顏色偏紅,而有的偏黃?是因?yàn)樘ヅQ孱伾怯裳t蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的,主要是受血紅蛋白影響。

  血紅蛋白含量很低時(shí),含少量膽紅素,呈淡黃或金黃。血紅蛋白含量高時(shí),會(huì)呈現(xiàn)淡紅色。

  需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過1個(gè)月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。

  2、血清如何解凍?

  血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷

  輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。

  3、使用前是否需要過濾?

  本公司血清在ISO 13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過3次0.1 μm過濾,出廠經(jīng)過檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無菌檢測(cè),污染幾率非常非常非常低(重要的事情說三遍)。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè),結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來的血清不需要再次進(jìn)行過濾。

  4、為什么血清中會(huì)有沉淀生成,主要成分是什么,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)有什么影響?

  血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),胎球蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻連蛋白,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀),膽固醇等。

  原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。

  預(yù)防:非必要,不用熱滅活;避免反復(fù)凍融;-20℃保存;4℃全融(期間間斷搖晃均勻);2000 rpm離心5分鐘(不建議用0.2 μm濾膜過濾),取上清使用。

  5、黑膠蟲是來源于血清嗎?

  目前科學(xué)界對(duì)黑膠蟲的身份并無定論, 通常是顯微鏡下觀察到密密麻麻的小黑點(diǎn)在培養(yǎng)基中自主游動(dòng),就稱為黑膠蟲污染。

  黑膠蟲在鏡下的典型特征呈卵圓狀、球狀、桿狀等,可引起細(xì)胞生長(zhǎng)遲緩或裂解凋亡。

  目前沒有充分的數(shù)據(jù)表明黑膠蟲來源于血清,因?yàn)槠涑叽邕h(yuǎn)大于血清過濾時(shí)所用的0.1微米(μm)濾膜。建議各位老師通過使用三抗(Cat#: C3422-0100)外加支原體處理試劑(Cat#: 03-038-1B)嘗試殺滅黑膠蟲。

  6、血清存在批間差嗎?

  答案是毋庸置疑的,因?yàn)檠鍋碓从趧?dòng)物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)

  條件不同而異。每個(gè)批號(hào)的組分和百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

  建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試,篩選出合適批號(hào),購(gòu)買半年甚至一年以上的用量,避免批間差造成實(shí)驗(yàn)波動(dòng)(胎牛血清在-20℃保存可達(dá)5年)。

  Tips:

  1、如果要除去血清中的沉淀,可以將血清分裝至無菌離心管中,400g 離心,留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞,因此不建議用過濾的方法。

  2、沉淀不是檢驗(yàn)血清的硬指標(biāo),但為了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)美觀、實(shí)驗(yàn)便利,還是應(yīng)該盡量減少沉淀的產(chǎn)生。掌握正確的血清解凍、使用方法,再加上一款品質(zhì)穩(wěn)定的優(yōu)秀血清,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來說,至關(guān)重要。

  對(duì)于血清知識(shí)點(diǎn),圍觀的看過來! 本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。


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