大家來了解下，細(xì)胞凍存的注意事項!

　　大家來了解下，細(xì)胞凍存的注意事項!

　　細(xì)胞凍存是利用細(xì)胞凍存管，將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。不妨來看看BUNSEN本生小編的詳解：

　　細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：

　　一般來說，細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移，最佳的策略是進(jìn)行低溫保存，而細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-70℃以下時，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均已停止，即代謝處于*停止?fàn)顟B(tài)，故而可以長期保存

　　1、從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前天盡量換培養(yǎng)液;

　　2、將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍傷;

　　3、凍存和復(fù)蘇盡量用新配制的培養(yǎng)液。

　　細(xì)胞凍存：

　　目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由冰晶形成的細(xì)胞損傷。

　　1、10%的DMSO+90%胎牛血清。甘油一般用于菌種保存很少用于細(xì)胞凍存。

　　2、取對數(shù)生長期的細(xì)胞，用胰蛋白酶把單層生長的細(xì)胞消化下來，懸浮生長的細(xì)胞則直接將細(xì)胞移至15ml離心管中。

　　3、離心1000 rpm,5 min.

　　4、去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5x10^6/ml~1x10^7/ml.

　　5、 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者。

　　6、 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)到-25℃以下時，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

　　大家來了解下，細(xì)胞凍存的注意事項!本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。