人Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒操作方法

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　　人Ⅰ型膠原試劑盒操作注意事項:

　　1、試劑應按標簽說明書儲存，使用恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

　　2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。

　　3、不同批號的試劑不要混用。

　　4、人Ⅰ型膠原試劑盒保質使用。

　　5、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

　　6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。

　　7、實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

　　人Ⅰ型膠原試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

　　1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　3、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘。

　　4、取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。

　　注意：盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

　　人Ⅰ型膠原試劑盒性能：

　　1、靈敏度：小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.1 ng/mL。

　　2、特異性：不與其它細胞因子反應。

　　3、重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

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